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耐碳青霉烯鮑曼不動桿菌耐藥性分析及產金屬酶檢測

【】2015-07-20 點擊次數
歐佳美 黃顯武 胡秋蓉:汕尾逸揮基金醫院 廣東汕尾 516600

耐碳青霉烯鮑曼不動桿菌耐藥性分析及產金屬酶檢測


歐佳美 黃顯武 胡秋蓉
CARBAPENEM-RESISTANT ACINETOBACTER BAUMANNII RESISTANCE ANALYSIS AND METAL ENZYME PRODUCTION ASSAYS
OU Jiamei, HUANG Xianwu, HU Qiurong


  【摘 要】 目的 研究碳青霉烯類耐藥的鮑曼不動桿菌耐藥性及其產金屬酶情況。方法 收集2013年1月~2014年1月醫院分離的鮑曼不動桿菌株;藥敏試驗采用K-B法,金屬酶檢測采用CAZ-EDTA協同試驗。結果 共檢出鮑曼不動桿菌68株,主要來自ICU、消化內科、急診病區等科室。其中耐碳青霉烯鮑曼不動桿菌30株(44%),耐藥菌中對哌拉西林、頭孢唑肟、氨曲南、復方新諾明、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢曲松、環丙沙星、頭孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦>90%耐藥;耐藥菌和非耐藥菌對阿米卡星和妥布霉素均<50%耐藥;30株耐藥株產金屬酶的有5株(16.7%)。結論 耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌的耐藥率維持較高水平;且主要集中在ICU;產金屬酶是其對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的重要機制之一,應加強對臨床產酶株的檢測,加強臨床抗生素的管理,指導臨床合理使用抗菌藥,減少耐藥株的產生。
  【關鍵詞】 鮑曼不動桿菌,碳青霉烯類,金屬酶,耐藥性
  doi:10.3969/j.issn.1671-332X.2015.02.009

  鮑曼不動桿菌是重要的醫院感染條件致病菌之一。其生存力強、定植率高、耐藥性強,極易造成院內感染的暴發流行[1]。碳青霉烯類抗生素是當前治療鮑曼不動桿菌感染的最有力的藥物之一,但是隨著它的廣泛應用,其耐藥率也有繼續上升趨勢,甚至出現泛耐菌株的流行,給嚴重感染患者帶來了極大的威脅。因此,了解我院鮑曼不動桿菌的耐藥情況及其產金屬酶的分析,為臨床醫師合理應用抗菌藥物、控制細菌耐藥性的發展提供參考依據。現報告如下。
1 材料與方法
1.1 菌株來源 68株鮑曼不動桿菌均來自我院2013年1月~2014年1月期間臨床送檢的各類標本,包括痰液、血液、分泌液和尿液等標本;同一患者相同部位多次分離的同一菌株不重復計入。
1.2 材料 血平皿、巧克力平皿、麥康凱平皿、M-H平皿均購自梅里埃(上海)生物制品有限公司;藥敏紙片購自天和微生物試劑有限公司;細菌鑒定卡購自bioMerieux;質控菌株為金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、大腸埃希菌 (ATCC 25922)、銅綠假單胞菌 (ATCC 27853)標準株均購自廣東省臨床檢驗中心。
1.3 儀器 細菌鑒定儀為梅里埃VITEK 2-Compact全自動微生物鑒定分析儀;5%CO2培養箱為YCP系列5%CO2培養箱(生產廠家:華曦電子科技有限公司);普通培養箱為數顯電熱培養箱(生產廠家:錦屏儀器儀表有限公司通州分公司)。
1.4 方法
1.4.1 細菌培養、鑒定和藥敏 培養按全國臨床檢驗操作規程(3版)[2]進行接種培養;鑒定采用VITEK 2-Compact全自動微生物鑒定分析儀進行鑒定,藥敏分析采用K-B紙片擴散法,操作和結果按美國臨床實驗室標準化委員會(CLSI)的標準。
1.4.2 金屬β-內酰胺酶的表型檢測 采用紙片協同法;在MH平板上涂布0.5麥氏單位待測細菌的菌液;貼上兩張亞胺培南紙片;兩紙片相距4 cm;在其中一個亞胺培南紙片的旁邊貼上一張空白紙片;兩紙片相距1.5~2.5 cm, 在空白紙片加3 μl 2-巰基丙酸原液, 35 ℃培養18~24 h;若靠近2-巰基丙酸紙片旁邊周圍出現抑菌效果增強或兩紙片之間出現協同敏感區;判斷為產MBLs。
1.4.3 統計學方法 所有數據均用 SPSS 11.5軟件包進行分析, 細菌耐藥率統計, 采用百分率; 耐藥率的比較采用2檢驗。以p<0.05為差異具有統計學意義。
2 結果
2.1 68株鮑曼不動桿菌中檢查30株耐碳青霉烯類
     68株主要來自ICU、消化內科、急診病區等科室;其構成比見表1。

表1 68株鮑曼不動桿菌及30株耐碳青霉
烯類科室來源表

[±s,n(%)]

科室名稱 總數/n 非耐碳青霉烯菌株數 耐碳青霉烯菌株數
ICU 20 5(25) 15(75)
急診病區 13 10(77) 3(23)
消化內科 11 4(36) 7(64)
腫瘤科 6 4(67) 2(33)
心血管內科 5 5(100) 0(0)
顱腦外科 3 1(33) 2(67)
老年科 3 3(100) 0(0)
骨科 2 2(100) 0(0)
普通外科 2 1(50) 1(50)
兒科 2 2(100) 0(0)
腎內科 1 1(100) 0(0)
合計 68 38(56) 30(44)

2.2 耐碳青霉烯類組和非耐碳青霉烯類組其它抗菌藥物耐藥率比較
     對耐藥菌和非耐藥菌進行分組采用2檢驗分析;其中復方新諾明、妥布霉素、環丙沙星、慶大霉素和左氧氟沙星具有統計意義(p<0.05)。

表2 耐碳青霉烯類組和非耐碳青霉烯類組
其它抗菌藥物耐藥率比較

(%)

抗菌藥物 耐碳青霉烯類組
(n=30)
非耐碳青霉烯類組
(n=38)
2 p
哌拉西林 100.0 94.7 0.31 >0.05
阿米卡星 6.6 2.6 0.4 >0.05
頭孢唑肟 96.7 86.8 0.98 >0.05
氨曲南 93.3 81.6 1.12 >0.05
復方新諾明 96.7 23.7 36.22 <0.01
妥布霉素 50.0 15.8 9.19 <0.01
頭孢噻肟 96.7 86.8 0.98 >0.05
頭孢曲松 100.0 84.2 3.42 >0.05
頭孢吡肟 96.7 84.2 1.63 >0.05
環丙沙星 100.0 42.1 25.68 <0.01
慶大霉素 66.6 13.2 20.65 <0.01
頭孢他啶 90.0 78.9 0.81 >0.05
左氧氟沙星 76.6 18.4 23.07 <0.01
哌拉西林/他唑巴坦 96.7 84.2 1.63 >0.05

2.3 MBLs檢測結果
     30株耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌有產金屬酶的有5株,占16.7%。
     3 討論
     鮑曼不動桿菌已成為我國院內感染的主要致病菌之一。根據2010年中國CHINET 細菌耐藥性監測網數據顯示,我國10省市14家教學醫院鮑曼不動桿菌占臨床分離革蘭陰性菌的16.11%,僅次于大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌。而碳青霉烯類抗生素是目前臨床應用最廣泛、 抗菌活性最強大的抗生素之一。隨著該藥的廣泛使用,已出現碳青霉烯類耐藥的鮑曼不動桿菌。對碳青霉烯類耐藥, 就意味著對現有的常用β-內酰胺類耐藥,甚至出現泛耐株引起的感染,泛耐株常常無藥可用,病死率高[3]。
     本研究發現我院耐碳青霉烯鮑曼不動桿菌的陽性率高達44%,而其中主要集中在ICU,有15例占50%,這主要與ICU患者病情較重、抵抗力差有關[4];有研究發現,年齡、混合感染、機械通氣、碳青霉烯類抗菌藥物及合并慢性阻塞性肺疾病是多重耐藥鮑曼不動桿菌感染的獨立危險因素[5];通過藥敏分析我院耐藥菌中耐藥率最低的是阿米卡星(66%)和妥布霉素(500%);而非耐藥菌耐藥率最低的也是阿米卡星(26%)和妥布霉素(158%),其主要原因可能與我院臨床醫生少用這兩種藥物有關;耐藥菌株中對哌拉西林、頭孢唑肟、氨曲南、復方新諾明、頭孢噻肟、頭孢吡肟、頭孢曲松、環丙沙星、頭孢他啶和哌拉西林/他唑巴坦耐藥率高達90%以上,對妥布霉素、慶大霉素和左氧氟沙星耐藥率也有50%~80%;而非耐藥菌只有哌拉西林耐藥率在90%以上,耐藥率低于50%有阿米卡星、復方新諾明、妥布霉素、環丙沙星、慶大霉素和左氧氟沙星6種;通過分耐藥組和非耐藥組統計分析,除了復方新諾明、妥布霉素、環丙沙星、慶大霉素和左氧氟沙星具有統計學意義(p<001),其他均無明顯差別;綜合表2分析,我院對治療耐碳青霉烯類菌引發的感染十分棘手,耐藥率低于50%且具有統計學意義的只有妥布霉素,這可能與臨床醫師預防性使用廣譜抗生素比例過高,造成多重耐藥菌株出現有關。因此,加強抗生素管理,防止抗生素濫用,特別是廣譜抗生素的濫用,對減少或延緩耐碳青霉烯類菌株的產生是至關重要的[6]。
     金屬酶(MBL )是最大的一種能夠水解碳青酶烯類抗菌藥物的β-內酰胺酶, 并且能使細菌對青霉素、頭孢菌素類和碳青酶烯類藥物廣泛耐藥,其耐藥基因由染色體或質粒介導,獲得性MBL主要分布于銅綠假單胞菌和不動桿菌屬中,可通過轉座子、質粒或Ⅰ類整合子等造成擴散[7-8];且產金屬酶是其對碳青霉烯類抗菌藥物耐藥的重要機制之一[9];本研究顯示30株耐碳青霉烯類鮑曼不動桿菌中有5株產金屬酶,檢出率為167%,由于產金屬的酶菌株易引起醫院感染暴發流行,因此, 臨床微生物實驗室應加強金屬酶的檢測。
     綜上所述,鮑曼不動桿菌對多種藥物的耐藥率高,且易出現耐碳青霉烯類,其耐藥機制復雜又易引起醫院感染暴發流行[10],因此,我們應重視其耐藥機制研究,加強金屬酶的臨床檢測,密切監測耐藥株的變遷和發展,減少耐藥菌株的出現和擴散。指導臨床合理,謹慎地使用碳青酶烯類抗菌藥物。

參考文獻
[1] TURTON JF, KAUFMANN ME, WARNER M, et al. A prevalent, multiresistant clone of Acinetobacter baumannii in southeast England[J]. J Hoap Infect,2004,58(3):170-179.



(接上頁)
[2] 葉應嫵,王敏三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].3版.南京:東南大學出版社,2007:801-880.
[3] 陳佰義,何禮賢,胡必杰,等.中國鮑曼不動桿菌感染診治與防控專家共識[J].中國醫藥科學,2012,2(8):3.
[4] 呂春梅,莫韶妹,馬潔葵,等. 綜合重癥監護室多重耐藥鮑曼不動桿菌的控制[J].現代醫院,2012,12(4):100.
[5] 林建青.ICU多重鮑曼不動桿菌感染的流行病學調查及耐藥性研究[J].中國現代醫生,2012,50(30):8-10.
[6] 余 琳,蘇丹虹,江鳳茹,等.多重耐藥鮑曼不動桿菌耐藥基因分析與同源性分析[J].實用醫學雜志,2013,29(12):2018-2021.
[7] CASTANHEIFA M,TOLEMAN M A,JONES R N,et al. Molecular characterization of a beta-lactamase gene, blaGIM-1,encoding a new subclass of metallo-beta-lactamase [ J].Antimicrob Agents Chemother,2004,48:4654-4661.
[8] LEE K, Y UM JH, YONG D, et al. Novel acquired metallo-betalactamase gene, blaG I M-17, in a class 1 integron from Acinetobacter baumannii clinical isolates from Korea[J]. Antimicrob Agents Chemother,2005,49:4485 -4491.
[9] 張 瓊.泛耐藥鮑曼不動桿菌耐藥機制研究進展[J].中國醫藥導報, 2012,9(8):13-14.
[10] 鐘海波,伍嘵鋒,曾 瑜,等.多重耐藥鮑曼不動桿菌ERIC-PCR的分子流行病學研究[J].現代醫院,2013,13(12):19-22.
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